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流動(dòng)相中加離子對(duì)試劑改善色譜峰的分辨率并能調(diào)整保留值

發(fā)布日期:2014-07-08 點(diǎn)擊:2518
  在反相色譜的流動(dòng)相中加入與被分離的堿性或酸性組分相反的酸性或堿性的離子試劑,有人把這種色譜方法稱(chēng)為反相離子對(duì)色譜。
  離了對(duì)試劑不能與被子測(cè)組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng),也不能干擾被子測(cè)組分的色譜峰,不能產(chǎn)生介質(zhì)效應(yīng),不能具有高紫外吸收性能。離子對(duì)試劑只能改善色譜峰的分離。
  使用離子對(duì)試劑的原理還有些不明白,似乎配位化學(xué)的原理,放大了被測(cè)組分的特性。也可能是一種捕俘的原理,使被測(cè)組分更集中了??傊黾恿朔蛛x的效果。下面的原來(lái)被子分離的酸性和堿性組分的個(gè)性不突出,可能與其它的組分或雜質(zhì)混在一起,缺乏自身的色譜選擇性。加了相反的離子對(duì)試劑或以后突顯出酸性或堿性組分的個(gè)性,能夠跳出來(lái)“鶴立雞群”,有了自身對(duì)稱(chēng)的峰形和與眾不同的。
  研究抗生素青霉素的藥物動(dòng)力學(xué)采用反相色譜反法定受試者用藥后的血藥濃度,開(kāi)始僅用磷酸鹽緩沖液-甲醇作為流動(dòng)相,測(cè)得青霉素的色譜峰較寬,所得的結(jié)果用計(jì)算青霉素藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)與文獻(xiàn)報(bào)道的差異較大。在流動(dòng)相中加入0.2mol/L的四丁基氯化銨離子對(duì)試劑后,在原青霉素色譜峰后又分出一小峰。這才是真正的青霉素。用加離子對(duì)試劑測(cè)定的結(jié)果計(jì)算青霉素藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù),比較符合規(guī)律。
  用兩種方法測(cè)定的血藥濃度(c)對(duì)給藥時(shí)間(t)作1gc-t.不加離子對(duì)試劑,青霉素的藥物半衰期(t0.5)>30min。加離子對(duì)試劑,青霉素的藥物半衰期在12—18min之間。
  加入流動(dòng)相中離子對(duì)濃度視其分子的大小而定。大分子的離子對(duì)試劑更佳濃度為5mmo/L或更小,小分子的離子對(duì)試劑的濃度應(yīng)大于5mmol/L。從下面的例子可以看加入流動(dòng)相中離子對(duì)試劑的濃度對(duì)分離的影響。用反相色譜分析某食品中的芝麻酸和防府劑,采用小分子的四丁基磷酸銨作為離子對(duì)試劑,<12mmol/L分離很差。綜上所述,在反相色譜的流動(dòng)相中加酸或堿改良劑,加緩沖物質(zhì)對(duì),加離子對(duì)試劑,這些加在一起會(huì)不會(huì)亂套呢?不會(huì),它們各司其職,一般來(lái)說(shuō)互不干擾。例如同時(shí)加改良劑乙酸和三乙胺就各起各的作用。

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